說(shuō) 明 書 產(chǎn)品名稱：FDA-PI 雙染細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒（200T） 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：FDA-PI 雙染細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒是專門用于檢測(cè)細(xì)胞活性的雙染色試劑盒。 

產(chǎn)品特點(diǎn)：

二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate, 簡(jiǎn)稱 FDA），是一種非熒光的疏水熒光素衍生物， 能主動(dòng)擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞膜（包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞和細(xì)菌細(xì)胞），一旦進(jìn)入細(xì)胞，經(jīng)胞內(nèi)酯酶水解二乙 酸基團(tuán)生成強(qiáng)熒光產(chǎn)物熒光素（Ex/Em=495/520 nm，發(fā)綠色熒光）。

此熒光素累積在含完整細(xì) 胞膜的細(xì)胞內(nèi)，從而用作細(xì)胞活力的指示標(biāo)志物。而不具有完整細(xì)胞膜或缺乏活力代謝的細(xì)胞都 無(wú)法聚集此熒光素，從而不會(huì)呈綠色熒光。 碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一種常用的細(xì)胞核熒光染料，作為一種溴化乙錠（EB） 的類似物，能夠嵌入堿基之間實(shí)現(xiàn)與 DNA 結(jié)合。這種結(jié)合沒(méi)有或者幾乎無(wú)序列傾向性，大約每 4-5 個(gè) DNA 堿基對(duì)結(jié)合一個(gè)染料。PI 也能與 RNA 結(jié)合，需要用核酸酶處理來(lái)區(qū)分 DNA 和 RNA 染色。水溶液中 PI 的最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)是 493/636 nm。一旦與核酸結(jié)合，熒光信號(hào)明顯增強(qiáng) 20-30 倍，最大激發(fā)波長(zhǎng)向紅色波段遷移~30-40 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)向藍(lán)色波段遷移~15 nm，從 而使其最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)變?yōu)?535/617 nm。PI 的摩爾吸光系數(shù)相對(duì)比較低，但是其具有足夠大 的斯托克司頻移來(lái)同時(shí)檢測(cè)核酸 DNA 和熒光標(biāo)記抗體，只需要使用恰當(dāng)?shù)臑V片。PI 適用于熒光 顯微鏡，共聚焦顯微鏡，流式細(xì)胞儀以及熒光計(jì)分析。 

PI 不能穿透細(xì)胞膜而被排斥在活細(xì)胞外，但是可以穿過(guò)破損的細(xì)胞膜而對(duì)核染色。利用這 一特性，通常與 Calcein-AM、Hoechst 33258 或 Hoechst 33342 等活細(xì)胞熒光探針一起使用， 同時(shí)對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞染色和鑒定，用于細(xì)胞凋亡相關(guān)的研究。也可以用作多重?zé)晒馊旧膹?fù)染 劑，兼容于各種細(xì)胞標(biāo)記技術(shù)，包括直接或者間接的熒光抗體檢測(cè)，mRNA 原位雜交，細(xì)胞結(jié) 構(gòu)特異性的熒光探針檢測(cè)法以及組織染色。PI 的單獨(dú)染色也可以進(jìn)行細(xì)胞周期的檢測(cè)。

FDA 可能與碘化丙啶（PI）共染色，因死細(xì)胞能攝取 PI，細(xì)胞被染成紅色；而活細(xì)胞不能 攝取 PI，只能被染成綠色。這一雙色分離死細(xì)胞和活細(xì)胞的方法比單色染色提供了一種相對(duì)更 精確的活細(xì)胞定量分析。

產(chǎn)品組成： 

FDA 溶液：二乙酸熒光素（FDA），丙酮（acetone）。濃度：10 μg/mL； 

PI 溶液：碘化丙啶（PI），DPBS。濃度：500 μg/mL。 

產(chǎn)品使用：

該產(chǎn)品在胰島活性檢測(cè)中的使用方法：

取含胰島的組織溶液 0.5 mL，加入 10 μL FDA，再加入 10 μL PI，稍混勻后避光室溫下 靜置染色 30 s 左右，在熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞染色情況，綠色激發(fā)光使死亡的細(xì)胞發(fā)出紅色熒 光，藍(lán)色的激發(fā)光使活細(xì)胞發(fā)出綠色熒光；可在綠色激發(fā)光下估算紅色細(xì)胞占整個(gè)細(xì)胞團(tuán)中的比 例；一般計(jì)數(shù) 50 個(gè)胰島細(xì)胞團(tuán)的活性，取其平均值±SD，即為胰島活性。 

產(chǎn)品規(guī)格：

FDA 溶液：2 mL/瓶 PI 溶液：2 mL/瓶 

保存條件：

棕色玻璃瓶包裝。-20℃保存，保質(zhì)期 6 個(gè)月。日常使用期間，可存放于 4℃保存。 

本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究